干細胞儲存

　　干細胞(Stem cell，SC)是一類具有自我更新(self-renewing)能力的多潛能細胞，在一定條件下，它可以分化成多種APSC多能細胞，是一類具有自我復制和多向分化潛能的原始細胞，即干細胞保持未定向分化狀態和具有增殖能力，在合適的條件或給予合適的信號，它可以分化成多種功能細胞或組織器官，醫學界稱其為“萬用細胞”，也有人通俗而形象地稱其為“干什么都行的細胞”。干細胞來源于胚胎、胎兒組織和成年組織。來自胚胎和胎兒組織的胚胎干細胞具有多潛能分化特性，可分化為成熟個體體內幾乎全部200多種以上的成熟細胞類型。而成年個體組織來源的成體干細胞(adult stem cell)有造血干細胞、神經干細胞和胰腺干細胞等。

　　中文名

　　干細胞儲存

　　外文名

　　Stem Cell Storage

　　干細胞儲存：將干細胞從不同的人體組織中分離培養出來后，再經過檢測鑒定，然后將其凍存于-196℃的深低溫中，以便于在臨床需要時可以將干細胞復蘇用于給病人回輸，達到治療疾病的目的。

　　應該用什么來冷凍干細胞?

　　這個問題的答案取決于你的細胞系，不過大多數成功的冷凍方案也有一些共同點。人們一般先用蛋白酶來解離細胞，然后進行離心，最后用含有冷凍保護劑的培養基重懸。經典的冷凍保存培養基，由90%的胎牛血清(FBS)和10%的DMSO組成，DMSO可幫助細胞抵御冷凍帶來的有害影響。但是如果你的細胞要用于人體，上述試劑就不合適了，它們可能有毒會帶來副作用。此外，使用90 FBS/10 DMSO混合物時，細胞復蘇之后的活性往往較差。近來，研究者們紛紛開始使用無動物源成份的試劑，以及更低濃度的DMSO。Caspase抑制劑常被用來避免細胞凋亡。

　　今年早些時候，RIKEN發育生物學中心的Teruo Akuta等人比較了不同的低溫保存方案和試劑，為自己的胚胎干細胞和誘導多能干細胞確定理想的培養基。他們發現，在冷凍前用鏈霉蛋白酶和螯和劑EDTA處理，可以提高干細胞的復蘇率。Akuta指出，干細胞喜歡抱團生長，但冷凍保護劑難以浸透較大的細胞團塊，用鏈霉蛋白酶和螯和劑EDTA可以將細胞分成大小均一的小簇。Akuta團隊還改良了商業化的低溫保護劑CP-1，CP-1含有羥乙基淀粉(植物源的冷凍保護劑)和DMSO。他們通過添加人血清白蛋白和乙二醇，進一步提高了培養基的效力。研究顯示，添加乙二醇時的復蘇效率最高，有活力的細胞占到44%。不過，這樣的組合并不一定適用于任何人。(延伸閱讀：Science：iPS臨床應用這次真的來了?)

　　“并沒有所謂的最佳冷凍保護劑，”牛津大學的Zhanfeng Cui說。他建議新手們嘗試不同試劑，查閱用到了相同細胞系的文獻。許多人直接把細胞放在10% 的DMSO里冷凍，然后等著出現好結果。“花幾個小時查文獻，就能為你節省大量的時間，”他指出。“培養干細胞是個高成本又費時的過程，我們要盡可能的保護資源。”